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Western/ELISA顯色底物大盤點

一、HRP辣根過氧化酶是常見的酶促發(fā)光或顯色的交聯(lián)酶，由于HRP比活高、特異性更強、分子量?。?0kD）、穩(wěn)定性好和作用底物范圍廣的優(yōu)點而得到廣泛使用。HRP的底物種類有不少，主要可以分為化學(xué)發(fā)光底物和生色底物2大類:1.化學(xué)發(fā)光底物：化學(xué)發(fā)光底物主要考慮的是：發(fā)光信號強弱——發(fā)光信號當(dāng)然越強越好，強發(fā)光信號持續(xù)的時間也是越長越好，還有就是背景低靈敏度高。原理：試劑中的發(fā)光物在辣根過氧化物酶的作用下發(fā)生氧化降解，并發(fā)射波長為428nm的光，此光可經(jīng)x光膠片(放射自顯影片)感光...

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CTAB作用原理

物理性狀呈白色或淺黃色結(jié)晶體粉末狀，有刺激氣味，易溶于異丙醇，可溶于水，震蕩時產(chǎn)生大量泡沫。能與陰離子、非離子、兩性表面活性劑有良好的配位性。具有優(yōu)良的滲透、柔化、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。作用原理CTAB是一種陽離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,具有從低離子強度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性。它能與核酸形成復(fù)合物：在高鹽溶液中（0.7mol/LNaCl）是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度（0.3mol/LNaCl）時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)...

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二甲基亞砜配制及作用

二甲基亞砜物理性質(zhì)二甲基亞砜，英文名稱DMSO。無色粘稠液體。有吸濕性。能與水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶于乙炔以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛，可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機合成，醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜的合成二甲基亞砜一般采用二甲硫醚氧化法制得，由于所用的氧化劑和氧化方式不同，因而有不同的生產(chǎn)工藝。甲醇二硫化碳法甲醇和二硫化碳為原料，以γ-Al2O3作催化劑，先合成二甲基硫醚，再與二氧化氮...

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紅細(xì)胞裂解液的工作原理及配制方法

紅細(xì)胞裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，它能既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。那么紅細(xì)胞裂解液的原理是怎么樣的呢？裂解液作用原理血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原，當(dāng)裂解液中含可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的時候就只會造成紅細(xì)胞的變形，生物通道擴大膨脹裂解，或者引起紅細(xì)胞的變形，而不會攻擊其他細(xì)胞；另外紅細(xì)胞有自己的電負(fù)性，滲透脆性（通常是一些非酶細(xì)胞裂解液的突破點），懸浮穩(wěn)定性，這都是區(qū)別于其他種類細(xì)胞的區(qū)別點。紅細(xì)胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細(xì)胞的。另外紅...

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蘇丹Ⅲ染色液的作用

蘇丹Ⅲ本身是一種有機物，所以易溶于脂肪，這個就是化學(xué)中的相似相溶原理。蘇丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，當(dāng)用蘇丹Ⅲ的酒精溶液處理含有脂肪的生物組織時，酒精中的蘇丹Ⅲ進(jìn)入脂肪中，將脂肪染成橘黃色。蘇丹Ⅲ適合用于生物脂肪材料的鑒定，可在光學(xué)顯微鏡下看到被染成橘黃色的小粒。蘇丹Ⅲ染色液染色步驟取材：取一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮。切片：用刀片在花生子葉的橫斷面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中待用制片：從培養(yǎng)皿中選取薄的切片，用毛筆蘸取放在載玻片中央；在花生子葉...

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蛋白酶K的作用及使用方法

白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，從林伯氏白色念球菌中純化得到，它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。由于蛋白酶K具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因此多用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解；其消化過程中通常加入EDTA以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用。蛋白酶K的一般工作濃度是50-100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4-12.5)均有活性。蛋白酶K可替代DEPC處理RNA抽提用的離心管和槍頭，實現(xiàn)滅活RNaseA的目的，也用于處理RNase-Free的水。充分降解組...

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氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）的作用

氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）又稱作硝基四氮唑藍(lán)。是一種黃色粉末,易吸濕，溶于水和乙醇，微溶于乙酸乙酯。其還原物（Diformazan）為黑紫色結(jié)晶性粉末，溶于多數(shù)有機溶劑。NBT的作用氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）可以作為脫氫酶和其它過氧化酶的底物。用于測定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose-6-phosphatedehydrogenase）；也是凝血因子I（fibrinogen）的沉淀試劑。氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）是堿性磷酸酶底物之一，與BCIP一起,在堿性磷酸酶的催化下生...

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溶菌酶的作用和優(yōu)點

溶菌酶（lysozyme）又稱胞壁質(zhì)酶（muramidase），主要存在于雞蛋清及動物的眼淚中。是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵，使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。1溶酶菌的作用溶菌酶對革蘭陽性菌、好氧性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣型芽孢桿菌等都有抗菌作用，而對沒有細(xì)胞壁的人體細(xì)胞不會產(chǎn)生不利影響。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA、RNA、脫...

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