Elisa檢測(cè)試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被豬藍(lán)耳病抗體（PRRS-Ab）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。

　　

　　在應(yīng)用Elisa檢測(cè)試劑盒時(shí)，首先要清楚下面內(nèi)容：我們測(cè)定Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原？對(duì)這兩種抗體，抗原分別作了測(cè)試，大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個(gè)對(duì)別，從而分辨出Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原？

　　

　　1、檢測(cè)抗原：

　　

　　常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法，其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難，特別是檢測(cè)微生物的抗原，因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原，這對(duì)于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)，可影響ELISA的結(jié)果。

　　

　　2、檢測(cè)抗體：

　　

　　檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法，這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM。這個(gè)方法是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體，接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單，但不適用于檢測(cè)其他種類的抗體，因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。

　　

　　Elisa檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)：

　　

　　1、試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

　　

　　2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　

　　3、預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋，直接取10μL加樣即可。

　　

　　4、所有液體組分使用前充分搖勻。

　　

　　5、Elisa檢測(cè)試劑盒需要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。