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細(xì)菌的培養(yǎng)和實驗步驟

發(fā)布時間:2013/11/27點擊次數(shù):668

在基因工程實驗和分子生物學(xué)實驗中,細(xì)菌是*的實驗材料。質(zhì)粒的保存、增殖和轉(zhuǎn)化;基因文庫的建立等都離不開細(xì)菌。特別是常用的大腸桿菌。大腸桿菌是含有長約3000kb的環(huán)狀染色體的棒狀細(xì)胞。它能在僅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的無機鹽的培養(yǎng)基上快速生長。當(dāng)大腸桿菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,其開始裂殖前,入一個滯后期。然后進(jìn)入對數(shù)生長期,以20~30min復(fù)制一代的速度增殖。后,當(dāng)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧耗盡或當(dāng)培養(yǎng)基中廢物的含量達(dá)到抑制細(xì)菌的快速生長的濃度時,菌體密度就達(dá)到一個比較恒定的值,這一時期叫做細(xì)菌生長的飽和期。此時菌體密度可達(dá)到1×109~2×109/mL。培養(yǎng)基可以是固體的培養(yǎng)基,也可以是液體培養(yǎng)基。實驗室中常用的是LB培養(yǎng)基。

 實驗試劑

1、胰蛋白胨

2、酵母提取物

3、氯化鈉

4、1mol/L NaOH

5、瓊脂粉

6、抗生素(氨芐青霉素、卡那霉素等)

實驗設(shè)備

1、培養(yǎng)皿

2、帶帽試管

3、涂布器

4、滅菌鍋

5、無菌操作臺(含酒精燈、接種環(huán)、滅菌牙簽等)

6、恒溫?fù)u床

實驗材料

大腸桿菌

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