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SW3020 膜再生液 參考說明書

發(fā)布時(shí)間:2025/11/19點(diǎn)擊次數(shù):67

產(chǎn)品簡介:

使用膜再生液可以對(duì)同一張膜進(jìn)行多次 Western Blot 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液 10-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪 Western Blot 實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一 張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差, 使可比性更強(qiáng)。  Western Blot


膜再生液特點(diǎn)是:

無毒無害,室溫下使用,室溫下保存;可對(duì)同一張膜進(jìn)行 5 次以上的 Western Blot 檢測。

適用:清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。


使用方法:

1. 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,室溫洗脫10-20分鐘,時(shí)間長短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化,洗脫某些抗體需較長時(shí)間,更有長達(dá)60分鐘之久,如果室溫洗脫效果不好,可將膜再生液加熱至50度,在50度水浴條件下進(jìn)行洗脫。

2. 取出膜,用洗滌液(如 TBST 等)漂洗兩次。

3. 此時(shí)膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。

注意事項(xiàng):  1. 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實(shí)際操作中,膜類型、抗體類型、 濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。

2. 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測,例如 DAB,NBT/BCIP。

3. 用 ECL 顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入 ECL 顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體 未除凈,須進(jìn)一步在再生液中浸泡,至膠片上無顯色。

4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用 BSA 封閉的膜更容易再生。

5. 盡量避免讓膜干燥。


相關(guān)產(chǎn)品:

PR1800 Western blotting 蛋白 MARKER

PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑(ECL 超敏發(fā)光液)

A1010 30%丙烯酰胺 (29:1)

P1015 4×蛋白上樣緩沖液(含 DTT)

T1080 20×TBS


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