儲存條件
2-8℃
中文名稱
支鏈淀粉含量檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Amylopectin Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號：BC4270-50T/48S

更新時間：2024-04-15

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1926

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

支鏈淀粉含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4270
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體50 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑三	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	-	2-8℃保存
試劑五	液體6 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體10mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：*50 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年。
標準品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產(chǎn)品說明：
支鏈淀粉又稱膠淀粉，一般由幾千個葡萄糖殘基組成，淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡(luò)合物，利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應(yīng)得到支鏈淀粉含量。

技術(shù)指標：
低檢出限：0.0044 mg/mL
線性范圍：0.0125-0.5 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。

二、測定步驟

分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)雙波長至530nm和755nm，蒸餾水調(diào)零。
標準液的稀釋：將10 mg/mL的標準溶液用試劑四稀釋至0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL標準溶液待測。
標準液稀釋可參考下表：

序號	稀釋前濃度（mg/mL）	標準液體積（µL）	試劑四體積（µL）	稀釋后濃度（mg/mL）
1	10	100	1900	0.5
2	0.5	800	200	0.4
3	0.4	500	500	0.2
4	0.2	500	500	0.1
5	0.1	500	500	0.05
6	0.05	500	500	0.025
7	0.025	500	500	0.0125

備注：實驗中每個標準管需200µL標準溶液。

操作表：(在1.5mL離心管中依次加入下列試劑)

試劑名稱	測定管	標準管	空白管
樣本（µL）	200	-	-
標準溶液（μL）	-	200	-
蒸餾水（µL）	-	-	200
試劑五（µL）	75	75	75
試劑六（µL）	50	50	50
蒸餾水（µL）	675	675	675
充分混勻，測定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白，755nm下的分別記為A’測定、A’標準、A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標準=（A標準-A空白）-（A’標準-A’空白）。標準曲線和空白管只需測定1-2次。

三、支鏈淀粉含量計算

標準曲線的建立

以支鏈淀粉標準溶液濃度為x軸（x，mg/mL），標準溶液對應(yīng)的ΔA標準為y軸（y，ΔA標準），建立標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（mg/mL）。

支鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：

反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測完成防止褪色。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

取0.01g紅豆于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進行樣本處理取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.370-0.045）-（0.233-0.015）=0.107，帶入標準曲線y=0.7564x-0.0006計算x=0.1423，按樣本質(zhì)量計算含量得：

支鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=5x÷W×3（稀釋倍數(shù)）=213.45 mg/g 質(zhì)量。
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BC0430/BC0435 ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性檢測試劑盒
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上一個：BC4265-100T/96S直鏈淀粉含量檢測試劑盒微量法