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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC0480-50T/24S
更新時間：2025-08-29
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：4142
010-50973130
產(chǎn)品分類
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注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0480
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑二：臨用前取1支加1.5 mL丙酮溶解，用不完的-20℃分裝保存一周，避免反復(fù)凍融；
2、 標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg熒光素，臨用前加入3.03 mL 50%丙酮（丙酮（V）：蒸餾水（V）=1:1）配成10 μmol/mL的熒光素標(biāo)準(zhǔn)溶液，可45℃水浴促進(jìn)溶解，-20℃分裝保存兩周，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品說明：
FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質(zhì)的轉(zhuǎn)化，是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。
FDA是一種無色化合物，在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應(yīng)，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm處有強吸收峰，通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、臺式離心機、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、丙酮（不可快遞）、研缽、30-50目篩。
三、FDA水解酶活性計算
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。
FDA活性（U/g 土樣）=（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品）×V反總÷W ÷T=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度 2μmol/mL；V反總：反應(yīng)總體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，1h=1/24d。
注意事項：
1. 盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣本，否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。
2. 測定之前進(jìn)行預(yù)實驗，若吸光值大于1.2，可適當(dāng)減少土樣質(zhì)量再測定。若吸光值過小，可增加土樣質(zhì)量或增加反應(yīng)時間來進(jìn)行測定。
實驗實例：
1、 分別取兩管0.1g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，取上清稀釋5倍進(jìn)行測定，用1mL玻璃比色皿測定吸光值，計算ΔA測定=A測定-A對照=1.148-0.066=1.082，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499，按土壤質(zhì)量計算酶活得：
FDA活性（U/g 土樣）=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W×5（稀釋倍數(shù)）= 5204.01 U/g 土樣。
2、 分別取兩管0.1g林土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，取上清稀釋5倍進(jìn)行測定，用1mL玻璃比色皿測定吸光值，計算ΔA測定= A測定-A對照=0.973-0.133=0.84，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499，按土壤質(zhì)量計算酶活得：
FDA活性（U/g 土樣）=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W×5（稀釋倍數(shù)）= 4040.08 U/g 土樣。
參考文獻(xiàn)：
[1] Sánchez-Monedero M A, Mondini C, Cayuela M L, et al. Fluorescein diacetate hydrolysis, respiration and microbial biomass in freshly amended soils[J]. Biology and Fertility of Soils, 2008, 44(6): 885-890.
[2] Paudel B R, Udawatta R P, Anderson S H. Agroforestry and grass buffer effects on soil quality parameters for grazed pasture and row-crop systems[J]. Applied Soil Ecology, 2011, 48(2): 125-132.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0240/BC0245 土壤蔗糖酶（S-SC）活性檢測試劑盒
BC0140/BC0145 土壤酸性磷酸酶（S-ACP）活性檢測試劑盒
BC0460/BC0465 土壤中性磷酸酶（S-NP）活性檢測試劑盒
BC0280/BC0285 土壤堿性磷酸酶（S-AKP/ALP）活性檢測試劑盒
土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒
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