產(chǎn)品內(nèi)容

名稱         20ml                                Storage

試劑(A): X-Gluc Solution(50×) 400µL -20 ℃ 避光

試劑(B): GUS Buffer               20ml     4 ℃ 避光

X-Gluc（X-GlcA）分子量為 521.8，CAS 號(hào)為 18656-96-7，是檢測(cè)大腸桿菌中 GUS 基因的底物，可快速檢測(cè)植物中 GUS 基因融合標(biāo)記。GUS 染色液在適宜的反應(yīng)條件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc 水解成藍(lán)色物質(zhì)，該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì)，具有 GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)，可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS 染色液多用于轉(zhuǎn)基因植物的 GUS基因表達(dá)分析。

操作步驟(僅供參考) ：
1、 配制 X- Gluc 染色液：取適量 X-Gluc Solution(50×)和 GUS Buffer，按 1:50 比例充分混勻，配制成X- Gluc 染色液，如取200ul X-Gluc Solution(50×)加入到10ml GUS Buffer中，即配成10ml GUS染色液，該染色液好現(xiàn)配現(xiàn)用，短期可 4℃保存 3d。
2、 取適量待染液片等組織加入適量 GUS 染色液，使 GUS 染色液*浸沒組織。
3、 37℃孵育 1-24h。隨著孵育時(shí)間的延長，藍(lán)色漸漸出現(xiàn)，當(dāng)表達(dá)量較高時(shí)，GUS 活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)。
4、 用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素，一般樣本浸沒于乙醇 1-3h，陰性對(duì)照呈白色。如有必要可重復(fù)該脫色步驟，以便*清除葉綠素。樣本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光學(xué)顯微鏡下觀察，白色背景上的藍(lán)色即為 GUS 表達(dá)位點(diǎn)。
注意事項(xiàng)：
1、 配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存 3d。
2、 X-Gluc Solution(50×)應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則染色效率會(huì)下降。
3、 由于組織特異性等原因，藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不**，應(yīng)注意摸索具體實(shí)驗(yàn)條件。擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí)，可以選真空滲入法來幫助底物滲入細(xì)胞,建議使用 GUS 染色液（G3060）。
4、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。